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APOBEC3F的克隆、真核表达及其抗HBV效应的初步研究

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目的克隆、体外真核表达载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)基因并研究其抗病毒效应。方法应用RT-PCR的方法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3F基因,构建HA-APOBEC3F融合蛋白真核表达载体pXFA3F,pXFA3F和具有复制能力的1.3倍HBV载体pHBV1.3共转染HepG2细胞,Western印迹检测APOBEC3F融合蛋白在HepG2细胞中的表达,ELISA方法检测细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg水平,实时定量PCR检测HBV相关mRNA水平变化。结果克隆了APOBEC3F基因,其经测序与GeneBank公布序列一致;构建的APOBEC3F真核表达载体pXFA3F经转染可在HepG2细胞中瞬时表达;APOBEC3F可抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌,可使转染细胞内HBV相关mRNA水平下降。结论成功克隆并真核表达了APOBEC3F基因,其在体外具有抗HBV生物学效应。

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来源
《医学分子生物学杂志》 |2007年第4期|315-318|共5页
作者
马涛; 雷延昌; 郝友华; 王宝菊; 杨东亮;
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作者单位

华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室;

武汉市430030;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R373.21;
关键词
APOBEC3F; 克隆; 真核表达; 抗HBV效应;

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