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异源双链分析法快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药性

         

摘要

目的 采用变性高效液相色谱(DHPLC)和Surveyor酶法分析结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药基因gyrA突变, 探讨这两种异源双链分析法在结核菌耐药快速检测中的应用价值.方法 102株结核分枝杆菌临床分离株(常规药敏试验显示80株氧氟沙星耐药, 22株敏感), PCR扩增gyrA基因氟喹诺酮类耐药决定区域, 与参照菌株M.tb Erdman的扩增产物形成异源双链, 然后分别采用DHPLC和Surveyor酶法检测基因突变, 同时进行DNA测序作为对照.结果 DHPLC法和Surveyor酶法与DNA测序法相比, 具有同样的检出率(均为100%), 80株耐药株均存在gyrA基因突变, 而22株敏感株均无基因突变发生.结论 DHPLC法和Surveyor酶法均可用来快速检测结核分枝杆菌氟喹诺酮类耐药.两者均简便, 稳定, 灵敏, 前者高通量, 全自动化, 但需要昂贵的设备; 后者成本低, 不需要特殊设备, 适合我国大部分临床实验室开展.

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