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孕期尼古丁暴露所致子代成骨细胞BMP-4/Smad信号通路的变化

         
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目的 探究大鼠孕期尼古丁暴露对子代成骨细胞(OB)BMP-4/Smad信号通路的影响.方法 将妊娠期大鼠分为对照组与实验组,对照组受孕第9天皮下注射2mg/(kg·d)生理盐水,实验组在受孕后第9天于皮下注射2mg/(kg·d)尼古丁,新生3天乳鼠处死后收集颅骨,采用钙钴法对OB碱性磷酸酶进行染色,反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)测定OB细胞中骨形态发生蛋白4(BMP-4)、Smad1、Smad5、Smad8、Runt相关转录因子2(Runx-2)、成骨相关转录因子(Osterix)、Smads泛素化调节因子1(Smurf1)表达,免疫印迹法(Western blot)检测OB中BMP-4、Smad1、Smad5、Smad8、Runx-2、Osterix、Smurf1蛋白表达.结果 ALP染色显示OB细胞胞体较大,细胞核染色呈蓝紫色,细胞质呈淡紫色,对照组ALP细胞阳性率为42.69％±5.16％,高于实验组(18.67％±3.19％),差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR结果显示实验组BMP-4、Smad1、Smad5、Smad8、Runx-2、Osterix mRNA表达量均低于对照组,Smurf1mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意意义(P<0.05).West-ern blot法检测结果显示,实验组乳鼠OB中BMP-4、Smad1、Smad5、Smad8、Runx-2、Osterix蛋白表达量均低于对照组,Smurf1蛋白表达量高于对照组.蛋白条带灰度扫描结果显示,实验组乳鼠OB中BMP-4、Smad1、Smad5、Smad8、Runx-2、Osterix蛋白相对灰度值均低于实验组,Smurf1蛋白相对灰度值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠孕期尼古丁暴露对OB具有一定的抑制作用,可能与上调Smurf1表达、抑制BMP-4/Smad信号通路和下调转录因子Runx-2、Osterix有关.

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