定量聚合酶链反应评估去白细胞滤器去除血液成分中巨细胞病毒的效果

陆萍; 凌冰; 方风琴; 季育华

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定量聚合酶链反应评估去白细胞滤器去除血液成分中巨细胞病毒的效果

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为了评估目前常用的去白细胞滤器去除血液成分中人巨细胞病毒(HCMV)的效果,我们在献血员中筛选获得HCMV-IgG、pp65皆阴性的血液,分离外周血单个核细胞(PBMC),将HCMV感染的人成纤维细胞与PBMC共培养,感染HCMV的PBMC经抗人成纤维抗体和抗CD45磁珠2次分选纯化后,将CD45+单核细胞加回原全血中,建立HCMV潜伏感染的模型,再用去白细胞滤器过滤.用实时聚合酶链反应(PCR)定量测定过滤前、后血液样本中的病毒载量,残留成纤维细胞所含的HCMV通过定量反转录PCR(RT-PCR)扩增脯-4-羟化酶exon12a mRNA来校正.结果显示,使用去白细胞滤器后,每单位(200 ml)全血血液中,白细胞的去除率为99.98%.全血中平均HCMV病毒载量从3 742拷贝/μl降至22.57拷贝/μl,降低2.50 log10 ,说明去白细胞滤器虽然可明显减少全血中HCMV病毒的载量,但并不能完全去除病毒.

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来源
《微生物与感染》 |2009年第1期|13-15,25|共4页
作者
陆萍; 凌冰; 方风琴; 季育华;
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作者单位

上海市血液中心,上海,200051;

上海市血液中心,上海,200051;

上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科,上海,200025;

上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科,上海,200025;

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正文语种 chi
中图分类药学;
关键词
巨细胞病毒; 去白细胞滤器; 成纤维细胞;

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