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肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段在大肠杆菌中克隆的研究

         

摘要

在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段,为P1蛋白基因片段的扩增、表达及探讨羧基端基因片段功能打基础.采用PCR扩增方法获取P1结构基因.扩增产物用SalI 和EcoRI酶切消化,回收1kb大小的DNA片段并与pUC19 DNA连接,转入大肠杆菌JM109菌株.用X-gal 平板及质粒图谱分析方法筛选重组克隆株,再用限制性核酸内切酶酶切图谱分析鉴定.经PCR扩增MP DNA 获得1条5.0 kb DNA片段.重组质粒限制性内切酶指纹图谱显示出2条带,1条为pUC19 载体 DNA带,另1条是1 kb的插入片段.实验获得肺炎支原体P1蛋白结构基因及含P1蛋白羧基端DNA片段的重组克隆株.

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