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肺鳞状细胞癌组织中LncRNA MIR205HG的表达及对癌细胞增殖克隆的影响和机制研究

         
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目的筛选肺鳞状细胞癌(squamous cell lung carcinoma,SQCLC)中差异表达且具有临床意义的潜在靶基因,并探究其在癌组织中的表达及其调控肺鳞状细胞癌发生发展的分子机制。方法通过临床数据库GEPIA找出在肺鳞状细胞癌中差异表达的长链非编码RNA(long noncoding RNAs,LncRNAs),进一步筛选出相较于正常肺组织表达差异性最显著的LncRNAs作为研究目的基因。通过PholyCSF数据库预测目的基因在肺鳞状细胞癌中发挥功能的形式。通过短发夹RNA(shRNA)介导敲低目的基因表达,利用细胞增殖实验、克隆形成实验验证目的基因在肺鳞状细胞癌发生发展中的重要性;通过分析与目的基因共表达基因参与的信号通路,探索其在肺鳞状细胞癌中发挥功能的潜在分子机制。结果研究最终选取在肺鳞状细胞癌中显著差异高表达的MIR205HG作为目的基因进行实验探究。肺鳞状细胞癌组织中MIR205HG表达显著高于正常肺组织(6.785±0.462 vs 1.084±0.036),差异有统计学意义(t=188.873,P<0.05),且随着临床分期越高MIR205HG表达水平越高(P=0.0472)。MIR205HG主要通过LncRNA形式在肺鳞状细胞癌中发挥功能。与shCTL组(0.988±0.039)相比,shMIR205HG#1组(0.709±0.032)和shMIR205HG#2组(0.736±0.026)细胞的增殖率明显降低,差异有统计学意义(F=66.163,P<0.001)。shMIR205HG#1组(0.324±0.021)和shMIR205HG#2组(0.402±0.023)细胞克隆形成速率明显低于shCTL对照组(1.809±0.019),差异有统计学意义(F=423.093,P<0.001)。shMIR205HG#1组(5.988±0.321)和shMIR205HG#2组(5.702±0.345)细胞中P53蛋白表达明显高于shCTL对照组(1.022±0.152),差异有统计学意义(F=285.386,P<0.001)。shMIR205HG#1组(3.857±0.362)和shMIR205HG#2组(3.698±0.314)细胞中下游P21蛋白表达亦明显高于shCTL对照组(1.106±0.253),差异有统计学意义(F=73.106,P<0.001)。结论lncRNA MIR205HG在肺鳞状细胞癌中显著高表达,可能通过P53信号通路参与肺鳞状细胞癌的增殖和克隆形成,可作为肺鳞状细胞癌的潜在药物治疗靶点。

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