大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量筛选研究

胡中华; 张文超; 段开明

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大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量筛选研究

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目的:对SD(Sprague Dawley)大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量进行筛选,获得优质凝胶图像.方法:本实验为8月龄SD大鼠,注射戊巴比妥钠麻醉后断头取海马组织,称蘑后加入裂解液,经过匀浆、孵育、离心等处理后测定蛋白浓度.拟采用银染法凝胶染色时上样量分别为200 μg、400 μg、600 μg、800 μg;拟采用考马斯亮蓝染法凝胶染色时上样量分别为1 000 μg、1 200μg、1 400μg、1 600μg.采用双向凝胶电泳后,分别采用银染和考染法凝胶染色.染色后凝胶采用Umax PowerLookⅢ扫描仪和photo-shop8.0图像软件进行扫描,采用ETTAN ImageMaster 2D Elite 4.01软件进行图像分析.结果:双向凝胶电泳胶图经扫描分析,蛋白质上样量400μg电泳银染后所获得的胶图蛋白质点区隔明显,背景清晰,经过点识别等处理后获得(756±42)个点;而蛋白质上样量200 μg、600 μg和800 μg电泳银染后获得的胶图蛋白质点较少;蛋白质上样量1 600μg电泳考染后所获得的胶图蛋白质点区隔明显,背景清晰,经过点识别等处理后获得(812±60)个点;而蛋白质上样量1 000 μg、1 200μg和1 400 μg电泳考马斯亮蓝染法后获得的胶图蛋白质点较少.结论:采用银染法SD大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量为400 μg时可以获得良好的凝胶图像;而采用考染法SD大鼠海马蛋白质组双向凝胶电泳上样量为1 600 μg时即可获得良好的凝胶图像.

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来源
《现代医药卫生》 |2011年第3期|321-322|共2页
作者
胡中华; 张文超; 段开明;
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作者单位

中南大学湘雅三医院麻醉科,湖南,长沙,410013;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类呼吸生理;
关键词
大鼠; 海马; 蛋白质组; 蛋白质电泳;

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