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AFP启动子与胸苷激酶基因治疗肝癌的实验研究

         

摘要

目的:探讨AFP启动子与胸苷激酶疗法对肝癌的作用.方法:采用含tk基因与潮霉素磷酸转移酶hy基因融合基因的真核表达载体及仅含潮霉素磷酸转移酶hy的空载体,以脂质体为介导,将这两种质粒分别转染肝癌细胞系HEPG2.潮霉素 B药物敏感实验筛选HEPG2,不同浓度丙氧鸟苷分别作用于 HEPG2,HEPG2-AFP-hytk 及 HEPG2-hy.结果:潮霉素B药物敏感实验筛选HEPG2,12天时HEPG2全部死亡的最低浓度为60μg/ml,30μmol/L丙氧鸟苷可最大限度杀死HEPG2-AFP-hytk.杀伤效应随时间而增强,作用24小时后开始出现毒性作用,至96小时死亡率>80%.仅含有18%的HEPG2-AFP-hytk 就可使周围20% 的HEPG2细胞死亡,总死亡率为38%.结论:60μg /ml潮霉素是筛选 HEPG2-AFP-hytk及 HEPG2-hy 阳性克隆的最佳剂量.30μmol/L 丙氧鸟苷是作用于HEPG2-AFP-hytk的最佳剂量.HSV-tk/GCV系统大于18%HEPG2-AFP-hytk开始具有旁观者效应,可提高疗效.

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