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siRNA沉默平滑肌细胞Cx43的表达及对细胞增殖的影响

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摘要

目的通过siRNA介导的RNA干扰技术沉默平滑肌细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达,观察其对平滑肌细胞增殖的影响。方法应用阳离子脂质体转染的方法,将化学合成的特异性378siRNA转染平滑肌细胞设为特异性siRNA组,并以转染非特异性siRNA和空白作为对照,半定量RT-PCR法分析转染不同时间(24、48、72、96 h)细胞Cx43 mRNA表达水平的变化;同时噻唑蓝(MTT)比色法检测平滑肌细胞增殖,观察转染不同浓度(50、100、1502、00 nmol/L)378siRNA对细胞增殖的影响。结果半定量RT-PCR结果显示与非特异性siRNA组及空白对照组相比,转染特异性378siRNA后Cx43 mRNA表达水平显著地下调并呈时间依赖性特点。MTT结果显示与空白对照组相比,转染低浓度(50 nmol/L)378siRNA早期(24、48 h)OD值开始降低,但差异无统计学意义(P>0.05),随着特异性siRNA浓度的升高,OD值显著降低(P<0.05)。200 nmol/L 378siRNA转染72、96 h对细胞的增殖抑制率分别为32.51%、42.67%(P<0.01),并呈浓度依赖性特点;而作为阴性对照的siRNA转染后则无上述作用。结论转染特异性378siRNA可有效沉默平滑肌细胞缝隙连接Cx43mRNA的表达并抑制平滑肌细胞的增殖。

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来源
《南昌大学学报：医学版》 |2008年第2期|11-14|共4页
作者
冯九庚; 封荣华; 段剑; 蒋丽萍; 洪涛;
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作者单位

南昌大学第一附属医院神经外科;

江西中医学院附属医院功能诊断科;

南昌大学医学院药理教研室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类医用实验动物学;
关键词
缝隙连接蛋白Cx43; RNA干扰; 平滑肌细胞; 增殖;

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