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基于ROS-NLRP3通路探讨麦粒灸治疗佐剂性关节炎大鼠的作用及机制

         

摘要

目的探讨麦粒灸通过调控ROS-NLRP3炎性通路从而对类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)发挥抗炎镇痛效应的分子机制。方法将47只雄性SD大鼠通过SPSS软件随机程序分为空白组、模型组、模型艾灸组、ROS过表达组、ROS过表达艾灸组。其中空白组7只,其余4组每组10只。对空白组大鼠从右后足垫进行皮内注射无菌生理盐水,其余通过右后足垫皮内注射弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)诱导关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠模型。FCA造模后,ROS过表达组和ROS过表达艾灸组于造模后第2天皮下注射鱼藤酮油溶液(1.5 mg·kg^(-1))制备ROS过表达模型。模型艾灸组和ROS过表达艾灸组造模后7 d取大鼠足三里穴、肾俞穴进行麦粒灸治疗,各穴5壮,两侧交替。艾灸治疗6天为1个疗程,疗程之间休息1 d,共治疗3个疗程。空白组、模型组及ROS过表达组按同法固定,不予艾灸治疗。造模、治疗前后观察大鼠足跖肿胀度、热痛阈及屈腿嘶鸣评分变化;治疗结束后取材,采用ELISA法检测大鼠血清中IL-1β、IL-18炎症因子变化;Western blot法检测大鼠踝关节炎性组织NLRP3蛋白、ROS相关蛋白活性氧调节因子1(ROMO1)表达量;qPCR法检测下丘脑ROS相关ROMO1 mRNA的表达量。结果ROS过表达组体质量在实验周期内无明显增加,其余各组均有增加(P<0.05)。与空白组相比,模型组右足肿胀度、热痛阈提高百分率、屈腿嘶鸣评分均有显著升高(P<0.01),而艾灸后模型艾灸组右足肿胀度、热痛阈提高百分率、屈腿嘶鸣评分则显著下降(P<0.01)。同时,与空白组相比,模型组踝关节炎性组织NLRP3、ROMO1表达量及下丘脑ROMO1 mRNA表达量、IL-1β、IL-18水平显著上升(P<0.01),而模型艾灸组艾灸后以上炎症通路及炎性因子表达量均显著下降(P<0.01);与ROS过表达组相比,ROS过表达艾灸组行为学表现(足肿胀度、痛阈提高百分率、屈腿嘶鸣评分)均有显著改善(P<0.01),踝关节炎性组织NLRP3、ROMO1表达量及下丘脑ROMO1 mRNA表达量、IL-1β、IL-18水平显著下降(P<0.01)。结论麦粒灸可能通过抑制AA模型大鼠ROS-NLRP3-IL-1β炎性通路从而发挥抗炎、镇痛作用。

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