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基于壳聚糖的还原敏感型siRNA纳米递送系统的构建及性质研究

         

摘要

目的:基于还原敏感型壳聚糖(chitosan-disulfide-nona-arginine,CsR)构建小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)纳米递送系统并考察其保护siRNA稳定性的能力和还原敏感响应性能。方法:采用离子胶凝法制备CsR纳米粒(nanoparticles,NPs),考察处方因素对NPs粒径、Zeta电位及包封率的影响,并采用透射电子显微镜观察NPs形态。采用琼脂糖凝胶电泳考察CsR NPs与siRNA的结合能力、抗核酸酶降解能力和血清稳定性。将CsR/siRNA NPs与不同浓度的还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)孵育以评价其还原敏感响应性能。结果:当CsR与siRNA质量比为20∶1,三聚磷酸钠浓度为0.5 mmol/L时,制备得到球形NPs,粒径为(238.36±7.72)nm,Zeta电位为(7.57±1.22)mV,包封率为(93.21±4.12)%。琼脂糖凝胶电泳结果表明,CsR NPs与siRNA紧密结合,保护其免受核酸酶降解,维持siRNA血清中稳定至少24 h,并可响应高浓度GSH释放siRNA。结论:CsR NPs具有压缩、保护siRNA的能力和还原敏感响应性能,可作为优良的纳米载体实现siRNA的体内有效递送。

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