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转Bt基因欧洲黑杨转化TA29-Barnase基因的研究

         

摘要

为了获得雄性不育转Bt基因欧洲黑杨,在以叶片为外植体建立转Bt基因欧洲黑杨叶片组培再生体系的基础上,利用农杆菌介导叶盘法将TA29-Barnase基因转化到转Bt基因欧洲黑杨中.结果表明,转Bt基因欧洲黑杨叶片不定芽分化最适培养基为:MS+0.5 mg· L-1 6-BA+0.05 mg·L-1NAA+0.01 mg·L-1 TDZ+30 g·L-1蔗糖+6g·L-1琼脂;不定芽生根最适培养基为:1/2MS+0.05 mg·L-1 NAA +0.2 mg·L-1 IBA+20 g·L-1蔗糖+6 g·L-1琼脂;经过在叶片不定芽诱导及生根诱导培养基添加除草剂PPT连续筛选,共获得9株抗性植株.对抗性植株进行基因特异性PCR检测,其中有5株呈阳性,转化阳性率达55.6%.初步表明获得了转Barnase基因的转Bt基因欧洲黑杨植株.

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