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百里香属植物ISSR-PCR和SRAP-PCR 体系的确立及优化

         

摘要

通过对 PCR 扩增体系中的模板 DNA 用量,Mg2+、dNTPs和引物浓度的单因子实验,分别建立了适合百里香属(Thymus L.)植物总 DNA 的 ISSR-PCR 及 SRAP-PCR 优化反应体系.ISSR-PCR 优化反应体系为:反应总体积20μL,含模板DNA 30 ng、Mg2+ 3.75 mmol·L-1、dNTPs 0.20 mmol·L-1、引物0.3 mmol·L-1和Taq DNA 聚合酶1 U.SRAP-PCR 优化反应体系为:反应总体积20μL,含模板DNA 30 ng、Mg2+ 2.50 mmol·L-1、dNTPs 0.10mmol·L-1、引物0.4 mmol·L-1和 Taq DNA 聚合酶l U.运用优化的反应体系对百里香属植物地椒(T. quinque-costatus Celak.)、地椒的亚洲变种[T. quinquecostatus var.asiaticus(Kitagawa)C.Y.Wu et Y.C.Huang]和百里香(T. mongolicus Ronn.)15个居群的总DNA进行了ISSR和SRAP初步分析,获得了较好的扩增结果.

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