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甘草酸二铵对百草枯刺激大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞分泌TGF-β1的影响

         

摘要

目的 探讨甘草酸二铵(DG)对百草枯(PQ)刺激大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)分泌转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 采用不同浓度的PQ溶液(200、400、600、800、1000、1500、2000μmol/L)诱导大鼠AECⅡ24 h,测定PQ对AECⅡ生存率的影响,了解IC50的PQ浓度.在1000μmol/L PQ诱导下,以0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0 mg/mL浓度DG干预AECⅡ24 h,测定细胞生存率,了解DG干预PQ诱导下AECⅡ最高生存率的DG浓度.再将AECⅡ分为3组,空白组、PQ组(以1000μmol/L PQ培养24 h)、DG组(先以0.6 mg/mL DG培养2 h,再以0.6 mg/mL DG+1000μmol/L PQ培养24 h).倒置显微镜观察AECⅡ的形态及生长情况;酶联免疫吸附法测TGF-β1含量;实时荧光RT-PCR测定TGF-β1 mRNA表达.结果 IC50的PQ浓度为920.87μmol/L,在1000μmol/L PQ诱导下,以0.6 mg/mL浓度DG干预AECⅡ24 h生存率最高.与空白组比较,PQ组TGF-β1水平及其mRNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与PQ组比较,DG组TGF-β1量及其mRNA的表达明显下降,差异有显著性(P<0.05).结论 本实验成功建立了合适的PQ损伤大鼠II型肺泡上皮细胞的模型及DG干预模型.PQ促进AECⅡ分泌TGF-β1,甘草酸二铵可以降低PQ诱导下AECⅡ分泌TGF-β1水平.

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