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BRAF VE1抗体在检测结直肠癌BRAF V600E基因突变中的应用

         

摘要

目的研究石蜡包埋结直肠癌组织中BRAF V600E抗体免疫组化染色条件,并评估免疫组化检测方法诊断的灵敏度和特异度。方法选用4例石蜡包埋结直肠癌组织标本(2例为测序证实的BRAF V600E突变型,2例为BRAF V600E野生型),分别在不同的抗原修复时间(24、32、40、48、56和64 min)下,采用抗BRAF V600E(VE1)鼠单克隆抗体进行BRAF V600E蛋白检测;选取最佳条件,对116例结直肠癌组织进行免疫组化染色;采用Sanger测序法对免疫组化阳性病例进行验证;以ARMS-PCR法为金标准检测116例结直肠癌组织中BRAF V600E突变状态。结果结直肠癌组织BRAF V600E免疫组化最佳抗原修复时间为32 min;免疫组化法检测结直肠癌组织BRAF V600E诊断的灵敏度为100%(3/3),诊断的特异度为99.1%(112/113),阳性的预测值为75%(3/4),阴性预测值为100%(112/112);两种方法检测结果一致性为99.1%(115/116)。结论采用BRAF V600E(VE1)抗体免疫组化染色与基因检测方法具有很高的一致性,是一种较为经济可靠的BRAF V600E筛查方法,值得在临床推广应用。

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