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藻蓝蛋白对小鼠精原细胞氧化损伤的保护作用及其机制

         
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目的探讨藻蓝蛋白（C-PC）对H2O2诱导的小鼠精原细胞（GC-1 spg）氧化损伤的保护作用及其机制。方法制备H2O2诱导的GC-1 spg氧化损伤模型。实验分为对照组、模型组及C-PC低、中、高3个剂量预处理组。C-PC各剂量组用不同浓度C-PC预处理24 h后,除对照组以外,其余各组细胞培养液中均加入H2O2,37℃孵育24 h。采用CCK-8方法检测各组细胞的增殖活性;采用二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）染色检测各组细胞产生活性氧（ROS）情况;采用流式细胞术检测各组细胞的坏死情况;采用Western blot方法测定各组细胞中受体相互作用蛋白-1（RIP-1）、RIP-3的表达情况。结果与对照组比较,模型组GC-1 spg增殖活性下降（F=76.86,q=23.01,P＜0.05）,细胞内ROS水平显著升高,坏死细胞增多（F=206.9,q=60.07,P＜0.05）;与模型组比较,C-PC低、中、高剂量组细胞增殖活性显著增加（q=4.45～10.83,P＜0.05）,细胞内ROS水平显著降低,坏死细胞减少（q=9.09～32.41,P＜0.05）。Western blot分析显示,与模型组比较,C-PC预处理可下调细胞中RIP-1、RIP-3表达（F=541.2、297.5,q=27.97～62.98,P＜0.05）。结论 C-PC对H2O2诱导的GC-1 spg氧化损伤具有明显的保护作用,可能与C-PC提高GC-1 spg的抗氧化能力,抑制GC-1 spg中RIP-1、RIP-3蛋白表达,降低细胞坏死有关。

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