miR-520激活内质网应激导致滋养细胞凋亡的相关研究

陈欣; 郭端英; 付振琳; 杨菁

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目的探讨miR-520通过激活内质网应激导致滋养细胞凋亡,从而参与复发性流产(RSA)的作用机制. 方法利用miR-520慢病毒(实验组)和空载慢病毒(对照组)分别感染人滋养细胞系HTR8细胞,并用嘌呤霉素筛选出稳转株.以未感染细胞为空白对照,利用流式细胞术及荧光显微镜观察确定病毒转染效率、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-520的表达水平;通过CCK-8法测定细胞增殖能力、流式细胞术分析细胞凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞损伤程度、Mito-Tracker Red CMXRos试剂盒检测线粒体膜电位变化;通过Western blot检测凋亡通路中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9以及cleaved Caspase-12水平的变化,同时检测内质网应激相关蛋白CHOP、葡萄糖调节蛋白GRP78的水平变化. 结果与对照组比较,miR-520在人滋养细胞系HTR8细胞中过表达后,HTR8细胞增殖能力显著下降(P＜0.05),LDH活性升高(P＜0.05),HTR8细胞线粒体膜电位降低(P＜0.05),细胞凋亡数显著增加(P＜0.05);凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9以及cleaved Caspase-12水平均有不同程度的增高(P＜0.05),同时内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78表达水平上调(P＜0.05). 结论 miR-520可能通过激活内质网应激诱导HTR8细胞发生凋亡,从而参与RSA的发生.

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来源
《生殖医学杂志》 |2020年第8期|1067-1073|共7页
作者
陈欣; 郭端英; 付振琳; 杨菁;
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作者单位

武汉大学人民医院生殖医学中心湖北省辅助生殖与胚胎发育医学临床研究中心武汉 430060;

深圳市龙岗区人民医院深圳518100;

武汉大学人民医院生殖医学中心湖北省辅助生殖与胚胎发育医学临床研究中心武汉 430060;

武汉大学人民医院生殖医学中心湖北省辅助生殖与胚胎发育医学临床研究中心武汉 430060;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类人体胚胎学（人体胎生学、发生学）;不育症;
关键词
miR-520; 内质网应激; 滋养细胞凋亡; 复发性流产;

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