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下调lncRNA LOXL1-AS1表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

         

摘要

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)类赖氨酰氧化酶1反义RNA1(LOXL1-AS1)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR检测lncRNA LOXL1-AS1、miR-28-5p和IGF-1在乳腺癌细胞(MCF-7细胞)和人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A细胞)及收集的55例乳腺癌组织和癌旁正常组织中的表达量。采用lncRNA LOXL1-AS1 siRNA、miR-28-5p inhibitor、IGF-1 siRNA分别转染MCF-7细胞,MTT法检测MCF-7细胞的增殖活力,Transwell分析MCF-7细胞的侵袭情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况。生物信息学软件(miRanda)和双荧光素酶报告基因实验分析lncRNA LOXL1-AS1和miR-28-5p之间的作用靶点及相关性,TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-28-5p与IGF-1之间的作用靶点及相关性;pcDNA-LOXL1-AS1与miR-28-5p mimics共同转染MCF-7细胞后,MTT法检测MCF-7细胞的增殖活力,Transwell分析MCF-7细胞的侵袭情况,流式细胞仪检测MCF-7细胞凋亡情况。结果MCF-7细胞内lncRNA LOXL1-AS1和IGF-1表达高于MCF-10A细胞(P<0.01),miR-28-5p表达低于MCF-10A细胞(P<0.01)。与癌旁组织相比,乳腺癌组织中lncRNA LOXL1-AS1和IGF-1表达明显升高(P<0.01),miR-28-5p表达明显降低(P<0.01)。转染lncRNA LOXL1-AS1 siRNA或IGF-1 siRNA后,MCF-7细胞增殖活力降低,细胞侵袭数目减少,细胞凋亡率增加(均P<0.01)。lncRNA LOXL1-AS1靶向miR-28-5p,miR-28-5p靶向IGF-1;miR-28-5p表达下调后,MCF-7细胞增殖活力提高,细胞侵袭数目增加,细胞凋亡率减少(P<0.05);pcDNA-LOXL1-AS1与miR-28-5p mimics共同转染MCF-7细胞后,MCF-7细胞增殖活力提高,侵袭数目增加,细胞凋亡率减少(均P<0.05)。结论lncRNA LOXL1-AS1在MCF-7细胞中表达上调,下调lncRNA LOXL1-AS1表达通过影响miR-28-5p/IGF-1轴抑制了乳腺癌增殖和侵袭。

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