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miR-181a通过调控Toll样受体参与儿童过敏性紫癜肾炎PS/iPS的激活

         

摘要

目的 探究miR-181a在儿童过敏性紫癜肾炎中的免疫调节机制.方法 收集我院儿童过敏性紫癜(HSP)患儿和正常健康体检儿童的外周血,分离外周血单核细胞(PBMC),采用实时定量qRT-PCR检测样本PBMC中miR-181a表达水平.分析非肾型过敏性紫癜患儿(HSP-nonN)、儿童过敏性紫癜肾炎(HSPN)患儿和健康对照儿童(HC)间不同miRNAs的表达差异,利用miRNA数据库对其靶基因进行预测.采用qRT-PCR定量检测HSPN,HSP-nonN和HC儿童PBMC中Toll样受体(TLR)、低分子量蛋白2(LMP2)/β1亚基表达水平;蛋白质免疫印迹(Western blot)检测TLR的表达水平.利用TLR2抑制剂(INH14)处理各组PBMC,qRT-PCR检测LMP2/β1亚基比值和P65磷酸化水平.结果 HSP组血清miR-181a表达高于健康对照组(P<0.005),HSPN组miR-181a表达高于HSP-nonN组(P<0.005).miR-181a的靶基因高度预测为Toll样受体.qRT-PCR和Western blot结果显示,HSP-nonN组和HSPN组TLR2 mRNA水平均高于HC组(P<0.05),HSPN组LMP2/β1亚基比值高于HSP-nonN组(P<0.05);INH14处理后HSPN组LMP2/β1亚基比值明显低于HSP-nonN组(P<0.05).HSPN组PBMC的P65磷酸化多于HSP-nonN组和HC组,INH14处理后,HSPN组的P65磷酸化明显降低.结论 miR-181a通过TLR2激活NF-κB信号通路参与儿童过敏性紫癜肾炎的PS/iPS转换.

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