小鼠不同类型孤雌激活卵的形成及其孤雌胚发育状况的研究

邱小燕; 赵先晟; 李跃民

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注射hCG 18h后收集小鼠卵母细胞,采用不同试剂和作用不同时间对其进行激活,观察不同类型激活卵的形成情况及孤雌胚的发育状况,并对单倍体孤雌胚进行了核型分析。结果表明:1)几种激活方法均可得到均质单倍体、嵌合单倍体、1个原核(1PN)的杂合二倍体和2个原核(2PN)的杂合二倍体4种孤雌激活类型。乙醇及Srcl_2单独激活后出现单倍体的比率较高;而乙醇联合6-DMAP以及Srcl_2联合CB激活后出现二倍体的比率较高;2)10%的乙醇单独作用10min,卵母细胞激活率最高,达到63.3%;在激活卵的原核类型上,2-细胞(嵌合单倍体)的比率随着乙醇刺激强度的增加而增加,但乙醇单独激活后过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率较差;3)10%的乙醇处理5min后染色观察发现出现2细胞嵌合单倍体的比例较高,但接着用6-DMAP分别处理2、4、6h,跟踪观察发现杂合二倍体类型出现比率随时间延长而升高,处理6h后出现2PN杂合二倍体比率最高,且过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率也显著高于乙醇单独激活,但嵌合单倍体数量较不加6-DMAP时却减少;4)10%的乙醇、2mmol/L的6- DMAP联合5μg/mL的CB处理6h后,过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率与不加CB比较差异不显著;5)10mmol/L的Srcl_2单独及联合CB分别作用2、4h均能有效激活小鼠卵母细胞,单独及联合CB作用4h的激活率最高,两者差异不显著;在激活卵的原核类型,Srcl_2单独激活后出现单倍体类型的比率较高,而联合CB后出现二倍体的比率较高,且过二细胞阻滞率及桑葚胚的发育率与Srcl_2单独作用相比差异显著;6)先Srcl_2处理1h后染色观察发现形成均质单倍体的比例较高,但接着用CB分别处理1、2h,跟踪观察发现杂合二倍体类型出现比率大大提高,同时发现均质单倍体类型数目反而有所减少。结论:小鼠卵母细胞孤雌激活类型与不同激活试剂有关;不同类型激活卵的数目与激活剂浓度及作用时间有关;6-DMAP和CB有利于卵母细胞激活后形成二倍体孤雌胚;二倍体孤雌胚的发育情况较单倍体孤雌胚要好;嵌合单倍体激活卵可能由于卵裂球融合而形成二倍体激活卵;单倍体孤雌胚在8-细胞期开始出现二倍体核型,孤雌胚的核型中还出现较高比率的非整倍体。

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来源
《石河子大学学报:自然科学版》 |2009年第4期|449-454|共6页
作者
邱小燕; 赵先晟; 李跃民;
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作者单位

西南大学胚胎工程实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类生物技术遗传育种;
关键词
小鼠; 卵母细胞; 孤雌激活; 激活卵类型; 孤雌胚;

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