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转Bt基因植物中杀虫蛋白的酶联免疫检测技术研究Ⅰ.Bt菌HD-1的杀虫晶体蛋白抗原制备

         

摘要

研究了培养时间对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)HD-1菌株孢晶混合物的产量、杀虫晶体蛋白裂解液的种类和处理温度与时间对杀虫晶体蛋白提取率及纯度的影响.结果表明Bt HD-1菌株在Bt生长繁殖平板培养基上,30℃下培养41~55h均可获得大量孢晶混合物.采用50mmol/L Na2CO3裂解液处理孢晶混合物,可获得纯度高的130kD杀虫晶体蛋白,而用40mmol/L NaOH提取的杀虫晶体蛋白中含有较多杂蛋白.所研究的处理温度和时间对杀虫晶体蛋白提取量和组成无明显影响.这些结果为杀虫晶体蛋白抗原的制备提供了依据.

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