HBx和mIL-12双基因重组腺病毒的构建

李亚欧; 陈平; 李志勇; 文艳君

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HBx和mIL-12双基因重组腺病毒的构建

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目的构建携带双基因HBx和mIL-12的重组腺病毒Ad-HBx-mIL-12。方法采用酶切、连接的方法分别将基因HBx和mIL-12连接到穿梭质粒载体pAdenoVator-CMV5。将构建正确的穿梭质粒pAdV-HBx-mIL-12经EcoRⅠ酶切线性化后,转化于含腺病毒骨架质粒pAdenoVatorΔE1/E3的BJ5183感受态细菌,实现细菌内同源重组。将鉴定正确的重组腺病毒质粒pAd-HBx-mIL-12经PacⅠ酶切线性化后,以脂质体法转染至293细胞,包装并扩增获得携带双基因HBx和mIL-12的重组腺病毒Ad-HBx-mIL-12。结果经鉴定携带HBx和mIL-12双基因的重组腺病毒构建成功,并可在293细胞中有效表达。结论成功构建了携带双基因HBx和mIL-12的重组腺病毒Ad-HBx-mIL-12,为探讨其联合抗肿瘤机制及后续基因治疗奠定了基础。

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来源
《四川大学学报：医学版》 |2010年第6期|936-940|共5页
作者
李亚欧; 陈平; 李志勇; 文艳君;
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作者单位

四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室;

成都610064;

四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室;

成都610041;

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正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
HBx; mIL-12重组腺病毒基因治疗;

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