甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用

刘涛; 兰洋; 吴传芳

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甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用

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本文构建了甲基化CpG结合结构域(MBD)蛋白的原核表达质粒,并表达了GSTMBD融合蛋白,采用GST柱对该融合蛋白进行纯化.体外pull-down实验发现,GST-MBD融合蛋白能够与小鼠胚胎成纤维细胞MEF中oct4基因的启动子DNA结合,验证了该蛋白的体外生物活性.利用相同的实验方法,发现GST-MBD融合蛋白能够与MEF细胞中inhbb基因的启动子区结合,而不能与小鼠胚胎干细胞R1中的inhbb基因的启动子区DNA结合,同时采用半定量PCR方法检测到inhbb基因在R1细胞中高表达,而在MEF细胞中不表达,表明inhbb基因受到DNA甲基化的调控.

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来源
《四川大学学报：自然科学版》 |2014年第2期|408-412|共5页
作者
刘涛; 兰洋; 吴传芳;
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作者单位

四川大学生命科学学院;

成都610064;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类生物工程学（生物技术）;
关键词
表观遗传学; 甲基化CpG结合蛋白; Pull-down;

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