邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定

郑盛武; 赖丹; 赵肃清

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邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定

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[目的]制备并鉴定1种新型邻苯二甲酸二丁酯人工抗原.[方法]以4-硝基邻苯二甲酸为原料,经过酯化、还原生成4-氨基邻苯二甲酸二丁酯(DBAP),DBAP再与戊二酸酐反应,衍生生成4-戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯(DBCP).将合成的半抗原衍生物DBCP通过活性酯法与牛血清蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)偶联,得到人工抗原.通过免疫新西兰大白兔获得抗血清,经间接竞争酶联免疫法(icELISA)检测抗体特异性.[结果]经质谱、氢核磁共振谱图鉴定,半抗原衍生物合成成功,经紫外光谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫试验证实偶联成功,并计算得出DBCP与载体蛋白BSA和OVA的结合比分别为11∶1和17∶1.经icELISA法检测,兔1和兔2的血清效价均达到1∶128000,IC50分别为301和308 ng·mL-1,反应特异性较好.[结论]半抗原衍生物的合成是方便、安全的.邻苯二甲酸人工抗原的成功制备使获得DBP多克隆抗体以及建立DBP免疫分析方法成为可能.

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来源
《华南农业大学学报》 |2016年第2期|107-112|共6页
作者
郑盛武; 赖丹; 赵肃清;
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作者单位

广东工业大学轻工化工学院;

广东广州510006;

广东工业大学轻工化工学院;

广东广州510006;

广东工业大学轻工化工学院;

广东广州510006;

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正文语种 chi
中图分类免疫学检验;分析化学;
关键词
邻苯二甲酸二丁酯; 人工抗原; 光谱; 免疫鉴定;

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