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首页> 中文期刊> 《华南农业大学学报》 >Cas9融合RAD18因子提高HEK293T细胞的定点敲入效率

Cas9融合RAD18因子提高HEK293T细胞的定点敲入效率

         
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摘要

[目的]在哺乳动物细胞中,RAD51和RAD18是调节同源定向修复和非同源末端连接的关键因子.本研究目的在于探讨这2个因子在eSpCas9系统中对HEK293T细胞的定点敲入(Knock-in, KI)效率的影响,进而提高KI效率.[方法]通过构建eSpCas9-RAD51、eSpCas9-RAD18融合蛋白以及过表达RAD51、RAD18载体,比较它们的KI效率差异.[结果]eSpCas9-RAD18系统可以显著提高HEK293T细胞KI效率,约为原来eSpCas9系统的1.4～1.9倍(P＜0.01),而eSpCas9-RAD51系统和过表达RAD51/RAD18对KI效率无显著提高作用.[结论]本研究构建的eSpCas9-RAD18系统可以有效地提高HEK293T细胞的KI效率,可为基因编辑、基因治疗及定点转基因提供一种新的辅助整合工具.

著录项

  • 来源
    《华南农业大学学报》 |2021年第5期|8-18|共11页
  • 作者

    黄广燕; 王豪强; 李国玲; 吴珍芳; 张献伟;

  • 作者单位

    华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心 广东 广州 510642;

    华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心 广东 广州 510642;

    华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心 广东 广州 510642;

    华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心 广东 广州 510642;

    温氏食品集团股份有限公司 广东 云浮 527400;

    华南农业大学 动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心 广东 广州 510642;

    温氏食品集团股份有限公司 广东 云浮 527400;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因载体;
  • 关键词

    基因编辑; CRISPR/Cas9系统; 基因敲入; RAD18; 融合蛋白;

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