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金标银染基因检测方法中杂交信号的提高(英文)

         

摘要

研究了金标银染基因检测方法中的影响因素以及提高DNA杂交信号的途径.在"三明治"杂交系统中,着重研究了氨基DNA探针和纳米金标记巯基DNA探针对杂交的影响.随着氨基探针浓度的增加,杂交信号增加,探针达到一定浓度后信号不再增加,形成一个平台,说明连接于玻片表面的探针已达到饱和.由于纳米金颗粒空间位阻效应的影响大于纳米颗粒表面积的影响.标记的纳米金颗粒越大,杂交信号越弱.而随着金标巯基DNA探针浓度的增加,杂交效率显著增加,导致杂交信号提高.优化后的杂交条件为:氨基DNA探针浓度为125μmol/L,纳米金粒径为15 nm,DNA标记后的纳米金颗粒浓度为4.07nmol/L.通过上述杂交条件优化,可提高杂交银染的信号.

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