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逆转录病毒介导shRNA抑制Mig-7基因对人肝癌细胞血管生成拟态及体外侵袭转移的抑制作用

         
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摘要

目的 探讨逆转录病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰迁移诱导基因7(Mig-7)对肝细胞癌(HCC)细胞血管生成拟态(VM)形成及体外侵袭转移能力的影响.方法 设计2条Mig-7 mRNA寡核苷酸序列(Mig-7 shRNA-1,Mig-7 shRNA-2)和1条作为负对照的无关序列(Mig-7 shRNA-N).构建Mig-7shRNA逆转录病毒表达载体质粒,并将要接受转染的人肝癌细胞MHCC-97H分为6组:转染Mig-7 shRNA-1组;转染Mig-7 shRNA-2组;转染Mig-7 shRNA-N组;转染空载质粒组(Vector);重组人血管内皮抑素(ES,商品名:恩度)组;MHCC-97H细胞对照组(Control).半定量PCR、Western blot检测其对Mig-7表达的影响;三维细胞培养观察其对VM形成的影响;细胞间粘附实验、Transwell侵袭实验及迁移实验观察其对细胞粘附、侵袭及迁移能力的影响.结果 转染后,Mig-7 shRNA-1组与Mig-7 shRNA-2组中Mig-7 mRNA与蛋白的表达、MHCC-97H细胞形成VM能力、细胞侵袭、迁移能力明显减低(P＜0.05),细胞间粘附能力明显增加(P＜0.05);Mig-7 shRNA-N组、Vector组、ES组中MHCC-97H细胞Mig-7的表达、VM形成、细胞间粘附、迁移、侵袭能力较MHCC-97H细胞组均无明显变化.结论 逆转录病毒介导的shRNA能够有效下调Mig-7的表达并明显抑制HCC细胞VM形成能力及侵袭转移能力,增加细胞间的粘附作用;ES对HCC细胞的Mig-7表达、VM形成、侵袭转移及粘附能力无明显影响.

著录项

  • 来源
    《南方医科大学学报》 |2016年第11期|1482-1488|共7页
  • 作者

    屈波; 盛冠男; 余飞; 陈冠男; 吕琪; 毛中鹏; 郭龙; 吕毅;

  • 作者单位

    武警后勤学院附属医院肿瘤外科,天津300162;

    西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,陕西西安710000;

    锦州医科大学武警后勤学院附属医院培养基地,天津300162;

    锦州医科大学武警后勤学院附属医院培养基地,天津300162;

    锦州医科大学武警后勤学院附属医院培养基地,天津300162;

    武警后勤学院附属医院救援研究所,天津300162;

    武警后勤学院附属医院肿瘤外科,天津300162;

    西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,陕西西安710000;

    西安交通大学医学院第一附属医院肝胆外科,陕西西安710000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    血管生成拟态; 迁移诱导基因7; 肝癌; 侵袭; 转移;

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