重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA转染胰腺癌细胞BxPC-3及其沉默效应的研究

谭晶; 孙敏; 莫小华; 陆启瑜; 周小虎

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目的研究重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA转染胰腺癌细胞BxPC-3及其沉默效应.方法用重组质粒pSilencer4.1CMV neo-hTERT-siRNA转染BxPC-3胰腺癌细胞作为研究对象.实验分5组.T1组:pSilencer4.1CMV neo-hTERT1-siRNA;T2组:pSilencer4.1CMV neo-hTERT2-siRNA;Lipofectamine组:Lipofectamine;错配组:pSilence4.1CMV,作为阴性对照:细胞对照组:未做转染的细胞.RT-PCR检测hTERT基因表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western blot检测细胞端粒酶蛋白表达.结果与Lipofectamine组、阴性对照组及细胞对照组相比.T1组、T2组BxPC-3细胞中hTERT-mRNA和端粒酶蛋白的表达水平显著下降(P＜0.05).BxPC-3细胞活力明显降低(P＜0.05),G0/G1期细胞比例增高,S期和G2/M期细胞比例降低,细胞凋亡比例显著增加.结论重组质粒T1和T2能够下调hTERT mRNA和端粒酶蛋白的表达水平,具有良好的RNAi沉默效应.重组质粒T1和T2均明显抑制BxPC-3胰腺癌细胞的生长,使细胞周期发生阻滞,促进细胞凋亡,具有一定的体外抗胰腺癌作用.

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来源
《南方医科大学学报》 |2010年第8期|1847-1850|共4页
作者
谭晶; 孙敏; 莫小华; 陆启瑜; 周小虎;
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作者单位

昆明医学院第二附属医院肝胆胰外科,云南,昆明,650101;

昆明医学院第二附属医院肝胆胰外科,云南,昆明,650101;

昆明医学院第二附属医院肝胆胰外科,云南,昆明,650101;

昆明医学院第二附属医院肝胆胰外科,云南,昆明,650101;

昆明医学院第二附属医院肝胆胰外科,云南,昆明,650101;

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正文语种 chi
中图分类胰腺;
关键词
胰腺癌; RNA干扰; 重组质粒; 端粒酶; 凋亡;

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