CEA慢病毒载体的制备及其在树突状细胞中的表达鉴定

郑红; 张文玲; 赵国强; 董子明

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CEA慢病毒载体的制备及其在树突状细胞中的表达鉴定

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目的构建人癌胚抗原(CEA)慢病毒表达载体并包装成感染性病毒颗粒,获得稳定表达CEA的树突状细胞(DC).方法以人CEA的测序质粒为模板,PCR扩增CEA全长,装入pLentiGFP转移质粒,经过测序证实其序列与标准序列完全一致.将pLentiGFP-CEA、包装质粒p△8.2和pVSV-G用LipofectamineTM2000共同转染293T细胞,包装成感染性病毒颗粒,感染树突状细胞,并进行RT-PCR和Western blot检验CEA在细胞中的表达.结果 DC细胞病毒感染48h后荧光显微镜观察CEA慢病毒载体在细胞中高效表达,PCR扩增可得到人CEA的2009 bp基因片段,与预期大小一致,Western blot显示CEA在感染DC中表达.结论成功构建了CEA慢病毒表达载体,重组慢病毒感染DC细胞后表达出有活性的CEA蛋白,为进一步从分子水平探讨CEA的功能奠定了基础.

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来源
《南方医科大学学报》 |2009年第9期|1834-1836|共3页
作者
郑红; 张文玲; 赵国强; 董子明;
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作者单位

郑州大学基础医学院,河南郑州450052;

河南大学淮河临床学院,河南开封475001;

河南大学淮河临床学院,河南开封475001;

郑州大学基础医学院,河南郑州450052;

郑州大学基础医学院,河南郑州450052;

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正文语种 chi
中图分类肿瘤学实验研究;
关键词
癌胚抗原; 慢病毒载体; 树突状细胞;

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