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沉默CDK7基因对Hep G2细胞株的抗增殖作用

         

摘要

目的筛选对体外培养HepG2细胞抗增殖作用最强的反义寡脱氧核苷酸(anti-senseoligodeoxynucleotides,ASODN)序列,探讨经二次优化后该ASODN片段的抗增殖作用.方法根据RNAStructure 3.71计算机软件模拟人CDK7 mRNA获得的二级结构确定待选ASODN,经OligoWalk程序分析这些片段与mRNA互补时的热力学参数变化,以此优选待筛ASODN,以体外培养人肝癌Hep G2细胞为筛选体系获得抗增殖作用最强的ASODN,对该片段分别依次向互补区上、下游错位1~5个碱基获得10条ASODN,经结构优化后进行二次筛选.结果初筛结果显示互补于人CDK7 mRNA第284~303片段的部分硫代修饰ASODN抗增殖作用最强,为(40.4±12.6)%;二次筛选显示互补于第287~306片段的全磷酸硫代修饰AS ODN抗增殖作用最强,抑制率为(68.3±2.6)%,半数抑制浓度为(51.9±8.6)nmol/L.结论筛选得到的ASODN片段可显著抑制体外培养HepG2细胞的增殖,有可能作为先导化合物开发特异性CDK7抑制剂.

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