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抗人晚期糖基化终产物受体胞外段不同表位单克隆抗体的制备

         

摘要

目的制备抗人晚期糖基化终产物受体(RAGE)胞外段单克隆抗体.方法用纯化人重组RAGE胞外段(氨基酸序列23~342)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与NS-1融合制备杂交瘤,经筛选和两次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.结果和结论获得两株杂交瘤细胞B2.2和E10,其分泌单抗的亚型均为IgG2b.经ELISA、Western blot和流式细胞仪鉴定,证明两株单抗均可结合重组RAGE及表达于细胞表面的RAGE,且两株抗体识别的位点为远隔表位,所建立的双夹心法可用于检测可溶性重组RAGE.这两株抗体将为研究RAGE相关疾病提供有效的工具.

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