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抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体抑制肉瘤生长的初步研究

         

摘要

目的观察抗小鼠TLR-2胞外段B细胞识别表位抗体对小鼠肉瘤S180生长的影响.方法在对小鼠Toll样受体2(mTLR-2)B细胞优势表位预测的基础上,合成B细胞识别表位20 mer短肽,将其与载体蛋白偶联,制备免疫原.所得兔抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位多克隆抗体TSP-1纯化后,采用Westem blotting、免疫组织化学和流式细胞仪进行初步鉴定.小鼠肉瘤株S180细胞注射小鼠左后肢,其中实验组混合100μg纯化抗体TSP-1,无关免疫球蛋白对照组混合100 μg正常兔IgG,空白对照组仅接种S180.小鼠经麻醉分别于10、14、18 d处死,称量瘤质量并计算抑瘤率.结果Western blotting显示在相对分子质量约95 000处可见清晰的反应条带;免疫组织化学和流式细胞术检测显示抗体可与表达天然mTLR-2的J774A.1细胞反应;实验组小鼠肉瘤生长明显受到抑制,其瘤质量在10、14、18 d与对照组相比差异显著(P<0.05);抑瘤率分别为77%、51%和53%.结论局部应用抗mTLR-2胞外段B细胞识别表位抗体可抑制小鼠肉瘤S180生长,且表现在肿瘤生长的早期.

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