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首页> 中文期刊> 《南方医科大学学报》 >黑根霉胞外多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤活性

黑根霉胞外多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤活性

         
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cqvip:目的分析EPS硫酸酯化修饰中配料比对硫酸基取代度的影响及其硫酸酯化修饰对EPS抗肿瘤活性的影响。方法采用氯磺酸-吡啶法修饰EPS,氯化钡-明胶浊度法测定硫酸基取代度,分析酯化剂配料比对硫酸基取代度的影响;红外光谱分析硫酸基团是否与EPS结合形成硫酸酯;CCK-8法检测EPS硫酸酯(SEPS)抑制人结肠癌HCT 116增殖活性;Annexin V-FITC/PI双染法检测SEPS诱导HCT 116细胞凋亡活性。结果酯化剂和EPS配料比1∶1和2∶1条件下产物硫酸基取代度分别为0.98%(SEPS-1)和1.18%(SEPS-2),增加酯化剂配料比可以提高产物取代度(P<0.05)。红外光谱分析发现1249 cm-1附近出现-OSO3-的S=O伸缩振动吸收峰,表明硫酸基团与EPS结合形成硫酸酯。CCK-8实验表明,在0.02~0.10 mg/L各浓度梯度范围内,SEPS-1对HCT 116细胞增殖的抑制率明显高于EPS(P<0.05);在0.04、0.06、0.10 mg/mL浓度梯度水平时,SEPS-2活性高于EPS(P<0.05);在0.04~0.08 mg/L各浓度梯度水平,SEPS-1活性高于SEPS-2(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示SEPS-1诱导HCT 116细胞凋亡活性较EPS明显增强,随着SEPS-1浓度的增加,发生早期凋亡的细胞与坏死细胞相应增加,并呈现剂量依赖性,0.06、0.08、0.10 mg/mL处理组细胞早期凋亡率分别为6.38%、11.8%与12.5%,晚期凋亡和坏死细胞率分别为5.26%、8.04%、6.80%。结论黑根霉EPS硫酸酯化修饰中,酯化剂配料比对产物取代度有直接影响,增加酯化剂配料比可以提高产物取代度。黑根霉EPS硫酸酯化修饰可以提高其抗肿瘤活性,但取代度高低与活性高低没有直接关系。

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