新疆南疆地区牛乳头瘤病毒1型L1基因克隆及原核表达

张婉琪; 赵玉宾; 丁繁萍; 王青青; 王哲红; 胡建军

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新疆南疆地区牛乳头瘤病毒1型L1基因克隆及原核表达

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本研究以构建牛乳头瘤病毒1型L1基因原核表达系统pET32a-L1及表达牛乳头瘤病毒1型L1蛋白为目的,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础.从牛体表赘生瘤组织中提取DNA,PCR扩增L1基因片段,克隆至pGM-T载体.测序成功后将目的片段和表达载体经双酶切连接于表达载体pET32a中,并构建重组质粒pET32a-L1.重组质粒经双酶切、测序鉴定后转入表达宿主BL21中,IPTG诱导后表达融合蛋白L1,通过SDS-PAGE电泳和Western blot进行鉴定.结果显示,pET32a-BPV-1-L1重组质粒构建成功.经SDS-PAGE鉴定,诱导后表达的重组蛋白L1相对分子量约为75 kD,与预期结果大小一致;经Western blot检测牛乳头瘤病毒1型L1蛋白能与Anti-HPV antibody[BPV-1/1H8+CAMVIR]单克隆抗体产生反应.pET32a-BPV-1-L1原核表达系统得以成功构建并能表达牛乳头瘤病毒1型L1蛋白.

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来源
《塔里木大学学报》 |2021年第3期|16-21|共6页
作者
张婉琪; 赵玉宾; 丁繁萍; 王青青; 王哲红; 胡建军;
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作者单位

塔里木大学生命科学学院新疆阿拉尔 843300;

哈密市动物疫病预防控制中心新疆哈密 839000;

塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔 843300;

塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔 843300;

哈密市信访局新疆哈密 839000;

塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔 843300;

塔里木大学动物科学学院新疆阿拉尔 843300;

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正文语种 chi
中图分类家畜免疫学;
关键词
牛乳头瘤病毒1型; L1基因; 原核表达;

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