一种改良式质粒DNA提取方法的建立与应用

张林琳; 李磊; 李翔; 贺大林; 朱国栋; 王新阳

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一种改良式质粒DNA提取方法的建立与应用

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目的建立一种稳定、可靠的质粒DNA提取改良方法,探讨其在分子生物学实验研究中的应用价值.方法将含有目的质粒的菌株扩增后,运用改良后的碱裂解法进行质粒DNA小量提取,微量核酸仪测定提取质粒DNA的产量及纯度;采用琼脂糖凝胶电泳、内切酶酶切及质粒转染真核细胞鉴定提取质粒DNA的质量及转染效率.结果改良式质粒提取方法获得质粒DNA产量为3.2 mg/L菌液,A260/280=1.91;内切酶酶切完全;质粒DNA以超螺旋结构为主;真核细胞转染效率为20%左右.结论改良式质粒DNA抽提方法操作简单、实用,获得质粒DNA产量多、质量高,能达到分子生物学常规实验的要求.

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来源
《西安交通大学学报（医学版）》 |2007年第1期|106-108|共3页
作者
张林琳; 李磊; 李翔; 贺大林; 朱国栋; 王新阳;
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作者单位

西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科研究所,陕西西安,710061;

西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科研究所,陕西西安,710061;

西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科研究所,陕西西安,710061;

西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科研究所,陕西西安,710061;

西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科研究所,陕西西安,710061;

西安交通大学医学院第一附属医院泌尿外科研究所,陕西西安,710061;

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正文语种 chi
中图分类微生物遗传学;
关键词
质粒DNA提取; 酶切; 转染;

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