首页> 中文期刊> 《新疆医科大学学报》 >细粒棘球绦虫AgB8/1重组抗原表达系统的构建

细粒棘球绦虫AgB8/1重组抗原表达系统的构建

         

摘要

目的 构建pET32a-AgB8/1原核表达载体,并对其重组蛋白进行原核细胞表达.方法 从细粒棘球绦虫原头蚴中提取总RNA,反转录生成cDNA,以此cDNA为模板用基因特异性引物扩增EgAgB8/1基因编码其分泌型多肽的片段,经测序后,以此基因片段为依据,人工合成合成EgAgB8/1抗原编码核酸序列,将其克隆至pUCm-T载体,测序鉴定其正确性.通过对pUCm-T/AgB8/1重组质粒进行双酶切,将获得的AgB8/1抗原编码核酸序列用定向克隆技术克隆至原核表达质粒pET32a上,测序鉴定插入片段正确性后,转化至E.coli BL21 (DE3)Lys S,IPTG初步诱导表达pET32a-AgB8/1重组蛋白.用SDS-PAGE电泳分析鉴定重组蛋白的表达水平.结果 测序表明,AgB8/1抗原编码核酸序列正方向插入至pET32a质粒.SDS-PAGE电泳分析显示,IPTG诱导后重组蛋白得到成功表达,在相对分子量约28 kDa处有表达条带.结论 本研究成功构建了pET32a-AgB8/1原核表达质粒,并初步诱导表达出AgB8/1重组蛋白,为进一步研究其免疫学特性奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《新疆医科大学学报》 |2011年第3期|246-250|共5页
  • 作者单位

    新疆医科大学基础医学院病原学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学基础医学院病原学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学基础医学院病原学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学基础医学院病原学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学基础医学院病原学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;

    新疆医科大学第一附属医院包虫病重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830011;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 绦虫;
  • 关键词

    细粒棘球绦虫; AgB8/1重组抗原; 原核表达质粒;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号