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理冲汤干预卵巢癌肿瘤微环境的机制研究

         
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目的研究理冲汤含药血清对小鼠卵巢上皮癌ID8细胞抑制增殖和促进凋亡的作用,并观察理冲汤含药血清对于脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)血管成形过程的作用,为临床应用提供实验依据。方法采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测理冲汤含药血清对ID8细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测理冲汤含药血清对ID8细胞凋亡作用的影响;将HUVEC分别与理冲汤含药血清、调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)及抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)抗体进行共培养,分为8组进行:A,空白组(完全培养基);B,抗VEGF组(完全培养基+VEGF抗体);C,理冲汤含药血清组(理冲汤含药血清培养基);D,抗VEGF+理冲汤含药血清组(VEGF抗体+理冲汤含药血清培养基);E,Tregs组(完全培养基+Tregs);F,Tregs+抗VEGF组(完全培养基+Tregs+VEGF抗体);G,Tregs+含药血清组(Tregs细胞+含药血清培养基);H,Tregs+抗VEGF+理冲汤含药血清组(Tregs+VEGF抗体+理冲汤含药血清培养基)。通过小管成形实验观察各组血管生成情况差异,免疫荧光检测各组VEGF、基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase2,MMP-2)和基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase9,MMP-9)的表达情况。结果与空白组比较,理冲汤含药血清能够抑制ID8细胞的增殖,并且可以促进ID8细胞凋亡(P<0.05)与未加入Tregs各组相比,加入Tregs各组HUVECs呈现出明显的血管网状结构,而理冲汤含药血清组血管成网则不明显,VEGF抗体联合含药血清组血管成网情况最差;与未加入Tregs各组相比,加入Tregs各组VEGF、MMP-2和MMP-9的表达明显增高,理冲汤含药血清组表达较低,VEGF抗体联合理冲汤含药血清组表达最低。结论理冲汤对小鼠卵巢上皮癌ID8细胞有明显的抑制作用,并且可以促进其凋亡。同时理冲汤还可通过抑制VEGF、MMP-2和MMP-9的表达来抗血管的形成。

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