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厄洛替尼作用后表皮生长因子受体突变的人肺腺癌HCC827细胞对细胞因子诱导的杀伤细胞的杀伤敏感性

         
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目的 观察表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼及EGFR下游主要分子对人肺腺癌HCC827细胞表面NKG2D配体表达的影响,探讨厄洛替尼作用于肺腺癌HCC827细胞后,细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞对HCC827细胞杀伤活性的变化.方法 HCC827细胞分为空白对照组及厄洛替尼5、10 μmol·L-1组,应用流式细胞仪检测细胞表面NKG2D配体主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关蛋白(MIC)A、B及UL16结合蛋白(ULBP)1、2、3的表达.HCC827细胞培养24h后,分别以EGFR下游分子磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY294002、丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580、信号传导及转录激活因子3抑制剂STAT21、蛋白激酶C抑制剂Rottlerin进行作用,应用流式细胞仪分析HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的表达,并与空白对照组进行比较.乳酸脱氢酶释放法检测CIK细胞对空白对照组和厄洛替尼组HCC827细胞的杀伤活性.结果 与空白对照组比较,厄洛替尼5、10 μmol·L-1组HCC827细胞表面NKG2D配体MICB、ULBP1表达显著增高(P＜0.05),MICA、ULBP2、ULBP3表达差异无统计学意义(P＞0.05);厄洛替尼5μmol·L 1组与10 μmol·L-1组比较,HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达差异均无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组比较,SB203580组的HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达差异无统计学意义(P＞0.05),STAT21组的HCC827细胞表面NKG2D配体MICA、MICB表达显著增高(P＜0.05),LY294002组的HCC827细胞表面NKG2D配体MICA表达显著降低(P＜0.05),Rottlerin组的HCC827细胞表面NKG2D配体ULBP1表达显著增高(P＜0.05).同一效靶比时,CIK细胞对厄洛替尼作用后组HCC827细胞的杀伤率均显著高于未经药物作用组(P＜0.05).效靶比20∶1时经NKG2D单抗封闭后的CIK细胞对未经药物作用组和10 μmol·L-1厄洛替尼作用后组HCC827细胞的杀伤率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 厄洛替尼能增高HCC827细胞表面NKG2D配体表达,增强CIK细胞的杀伤活性.

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