阳离子脂质体介导小干扰RNA转染EOMA细胞时转染条件的优化

周晓彤; 沈振亚; 于曙东; 余云生; 叶文学; 黄浩岳; 焦鹏; 滕小梅

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目的优化在阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导下将小鼠NF-κB的小干扰RNA(siRNA)转染入EOMA细胞时的转染条件。方法将1.0μl和1.5μl的LipofectamineTM2000与20 pmol、30 pmol4、0 pmol5、0 pmol6、0pmol的带荧光标记的siRNA分别组合,制备成相应的转染混合物,转染小鼠血管瘤内皮细胞(EOMA细胞),于转染24 h后在荧光显微镜下计数阳性细胞率、MTT法检测各转染条件下EOMA的细胞活性。结果在siRNA量相同的情况下,分别采用1.0μl和1.5μl的LipofectamineTM2000进行转染其转染效率、细胞毒性无明显差异(P>0.05);转染混合物中siRNA浓度为50 pmol时,转染效率最高达到86%,继续增加siRNA的浓度,转染效率提高并不明显;siRNA浓度为60 pmol时转染混合物表现出较高的细胞毒性。结论以1.0μl LipofectamineTM2000与50pmol的siRNA组成转染混合物可以实现对EOMA细胞高效转染并保持较高的细胞活性。

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来源
《徐州医科大学学报》 |2005年第6期|507-510|共4页
作者
周晓彤; 沈振亚; 于曙东; 余云生; 叶文学; 黄浩岳; 焦鹏; 滕小梅;
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作者单位

徐州医学院附属医院心胸外科;

苏州大学附属第一医院心血管外科器官移植研究室;

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正文语种 chi
中图分类 R318.06;
关键词
阳离子脂质体; 小干扰RNA; 转染; 血管内皮细胞;

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