UHPLC-MS/MS法测定大鼠不同脑区乙酰胆碱的含量

咸友艳; 丁丽敏; 赵紫燕; 有雪斌; 刘荣霞

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UHPLC-MS/MS法测定大鼠不同脑区乙酰胆碱的含量

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建立一种快速、简便、准确的液-质联用法以检测大鼠4个脑区中内源性神经递质乙酰胆碱的含量.采用Waters Acquity UPLC HSS PFP柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,柱温为35℃,离子源为电喷雾离子源,采用正离子多反应监测扫描方式检测.健康大鼠麻醉后,快速于冰上取脑分区,样品称重,与5倍0.1%甲酸水匀浆,再与4倍0.1%甲酸乙腈(含内标)沉淀蛋白,离心取上清进行LC-MS/MS检测.在本研究所建立的实验条件下,乙酰胆碱的方法学验证结果符合相关规定,其浓度在0.5~200 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.99),定量下限为0.5 ng/m L,基质效应和回收率均大于80%,日内、日间精密度均在15%范围内,可准确、精密地检测大鼠脑区中乙酰胆碱的含量.由结果可知,乙酰胆碱在纹状体中含量显著高于其他3个脑区(P≤0.01,n=10).全面检测不同脑区乙酰胆碱的含量,能够根据其脑内含量的变化解析神经相关疾病的发病机制,有利于疾病的诊断和治疗.

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来源
《烟台大学学报：自然科学与工程版》 |2018年第3期|226-231|共6页
作者
咸友艳; 丁丽敏; 赵紫燕; 有雪斌; 刘荣霞;
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作者单位

烟台大学新型制剂与生物技术药物研究山东省高校协同创新中心分子药理和药物评价教育部重点实验室(烟台大学);

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正文语种 chi
中图分类药物分析;
关键词
超高效液相色谱-串联质谱; 内源性神经递质; 乙酰胆碱; 替代基质法;

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