地石榴ISSR扩增体系优化及应用

侯香莲; 杨大荣; 曹永强; 柳青; 彭艳琼

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地石榴ISSR扩增体系优化及应用

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以地石榴为材料,通过单因素试验,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子,如引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA浓度、退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合地石榴的IS-SR-PCR反应体系:20μL体系中,10×buffer 2.0μL,引物0.50μmol.L-1,dNTPs 0.15 mmol.L-1,Mg2+1.2mmol.L-1,Taq DNA酶1.25 U,模板DNA 25 ng.确定了适宜的退火温度为52℃.利用该优化后的体系从60条ISSR引物中筛选出了12条,随机选取2条对10份分布于不同地区的地石榴标本基因组DNA进行扩增,证实了该体系稳定可靠,可用于进一步分析地石榴居群遗传多样性.

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来源
《云南大学学报：自然科学版》 |2011年第s1期|310-316|共7页
作者
侯香莲; 杨大荣; 曹永强; 柳青; 彭艳琼;
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作者单位

中国科学院西双版纳植物园中国科学院热带森林生态学重点实验室;

云南昆明650223;

中国科学院研究生院;

北京100039;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类连续性出版物;
关键词
地石榴; ISSR-PCR反应体系; 优化;

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