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首页> 中文期刊> 《云南大学学报：自然科学版》 >夹心ELISA检测新冠病毒及其抗原方法的建立和验证

夹心ELISA检测新冠病毒及其抗原方法的建立和验证

         
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研究制备了快速检测新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)及其表面刺突糖蛋白受体结合域(receptor-binding domain,RBD)的ELISA试剂盒.该试剂盒由一对RBD单克隆抗体作为捕获抗体与检测抗体,其中检测抗体进行辣根过氧化物酶(HRP)偶联,通过方阵滴定法确定双抗夹心ELISA的最适工作条件.另外,对检测试剂盒进行线性、特异性、准确度、精密度等进行了验证.结果表明,双抗夹心ELISA方法中捕获抗体和酶标检测抗体的效价分别为1∶160000和1∶320000,试剂盒的定量检测下限为31 ng/mL.经验证,组装的试剂盒精密度为0.71%~1.59%,平均准确度为96.53%,与其他的同种属灭活病毒无交叉反应.试剂盒各项参数均符合《中国药典》(三部)2020版标准,表明该试剂盒适用于新冠病毒以及RBD抗原的快速检测.

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