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母体糖尿病环境对体外受精胚胎早期发育的影响

         

摘要

目的 通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)构建小鼠糖尿病(diabetes mellitus,DM) 模型后,运用体外受精技术研究母体高血糖环境对早期胚胎发育的影响.方法 选取6~8周龄ICR雌鼠经2次腹腔注射小剂量STZ构建小鼠糖尿病模型,并设实验对照组.实验母鼠体外受精得到2-细胞胚胎,统计受精率等,并将2-细胞胚胎移植至代孕母鼠体内.取14 d胎龄的胚胎提取总RNA,用Agilent 2100 Bioanalyzer系统对总RNA进行质检合格后,经过逆转录、标记、杂交、洗脱,芯片结果用Affymetrix Scanner 3000进行扫描,用Command Console Software 3.1读取原始数据,实验重复3次,比较实验组与对照组的基因表达的差异情况.结果 较高血糖组(血糖为9.5 ~ 15.5 mmol/L)母鼠卵子体外受精后发育到2-细胞胚胎的比例为52.3%与对照组的72.1%存在显著统计学差异(P<0.01),高血糖组(血糖值>15.5 mmol/L)胚胎发育到2-细胞的比例为44.2%与对照组相比也存在显著统计学差异(P<0.01).芯片筛选出差异表达基因121个(P<0.05),其中有119个基因实验组的表达量是对照组的0.5倍以下,2个基因实验组的表达量是对照组的2倍以上.结论 糖尿病小鼠的卵子与正常精子体外受精后发育到2-细胞的比例较对照组小鼠低,并且血糖值越高比例越低.由此说明母体糖尿病环境能影响其卵子的生长发育,并且这些影响可能是通过上调代谢相关基因和下调发育相关基因产生的.

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