人偏肺病毒TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用

陆柔剑; 张陵林; 谭文杰; 周为民; 王仲; 彭堃; 阮力

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目的:建立人偏肺病毒(hMPV)核酸特异的快速、敏感的TaqMan-MGB探针实时定量RT-PCR检测方法.方法:分别设计hMPV特异的引物与荧光标记探针,合成hMPV绝对定量RNA模板,建立实时荧光定量PCR方法,并与常规RT-PCR平行比较,对其灵敏性、特异性和可重复性,以及用于临床样本的适用性等进行评价.结果:本方法可对hMPV进行特异性诊断,检测灵敏度可达10拷贝/25 μL,检测线性范围至少可达10 1～10 6拷贝/反应,且实验重复性好,初步应用于北京地区采集的158份临床鼻咽拭子标本,定量RT-PCR检出31份标本阳性,明显高于常规RT-PCR方法(22/158).结论:建立了人偏肺病毒TaqMan-MGB探针定量RT-PCR检测方法,并初步证实可用于临床鼻咽拭子标本的检测,为开展hMPV的流行监测及临床早期诊断提供了技术手段.

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来源
《生物技术通讯》 |2008年第2期|207-209|共3页
作者
陆柔剑; 张陵林; 谭文杰; 周为民; 王仲; 彭堃; 阮力;
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作者单位

中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;

中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;

中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;

中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;

北京协和医院,北京,100730;

北京市第六医院,北京,100007;

中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
人偏肺病毒; TaqMan-MGB探针; 实时定量PCR;

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