锈菌夏孢子DNA的微量快速提取方法

余仲东; 高爱琴; 曹支敏

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锈菌夏孢子DNA的微量快速提取方法

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摘要

采用4种方法对毛白杨锈病单个夏孢子堆DNA提取和ITS-PCR扩增表明,钢珠法、玻片法均是锈菌基因组DNA微量快速提取的合适方法,以钢珠法最优,整个过程仅需30 min,并且可以获得与CTAB法、氯化苄法相同的PCR扩增结果.钢珠法是在提取液中加入2～3颗钢珠,靠钢珠在涡旋中的相互碰撞将夏孢子破壁,以同时加入NaOH(终浓度3.3%)和Chelex-100(终浓度1.6%)效果最好,ITS-PCR扩增能稳定得到700 bp片段.玻片法也能得到相同的结果.分析比较了4种方法的优缺点.

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来源
《生物技术通讯》 |2005年第1期|48-50|共3页
作者
余仲东; 高爱琴; 曹支敏;
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作者单位

西北农林科技大学,林学院,陕西,杨凌,712100;

西北农林科技大学,林学院,陕西,杨凌,712100;

西北农林科技大学,林学院,陕西,杨凌,712100;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类目的基因的获得;
关键词
钢珠法; 玻片法; DNA; PCR;

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