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骨髓间充质干细胞来源的外泌体通过促进轴突再生促进坐骨神经损伤修复

         

摘要

目的 探讨骨髓间充质干细胞源性外泌体(BMSC-EXOs)坐骨神经损伤修复的影响及机制.方法 提取并培养SD大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs)利用超速离心法提取BMSCs-EXOs并使用透视电镜、粒径分析、蛋白免疫印迹法进行鉴定.培养肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞,设计PC12细胞为对照组、30μg外泌体组、60μg外泌体组,使用免疫荧光法观察PC12细胞的吞噬标记的外泌体的情况和PC12细胞轴突生长情况;通过蛋白免疫印迹法检测细胞神经丝蛋白(NF-200)和生长相关蛋白(GAP-43)的表达水平.设计SD大鼠坐骨神经挤压损伤模型,将模型分组为损伤组、治疗组,使用免疫荧光法对各组坐骨神经进行检测分析.结果 使用超速离心法从BMSCs上清液中成功提取BMSC-EXOs,符合粒径及透视电镜形态、蛋白免疫印迹法定义.免疫荧光法检测PC12细胞吞噬BMSC-EXOs,并使PC12细胞的轴突再生增强,蛋白免疫印迹法检测轴突相关蛋白合成的增加,并随剂量增加而作用增强.3组PC12细胞轴突长度及轴突相关蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.01).在大鼠坐骨神经损伤模型中组织学观察损伤区域缩小,神经重新连接.结论 BMSC-EXOs可通过促进神经轴突再生而发挥治疗坐骨神经损伤作用.

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