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A20对脂多糖诱导人树突状细胞成熟度及功能的影响

         

摘要

目的探讨A20对脂多糖诱导的树突状细胞成熟度及功能的影响。方法在脂多糖诱导树突状细胞成熟过程中,沉默A20,采用定量RT-PCR检测树突状细胞中A20的表达水平,流式细胞术检测树突状细胞表面共刺激分子CD80、CD86及HLA-DR的表达水平,ELISA检测树突状细胞分泌的细胞因子IL-1β、IL-6和IL-27的水平。结果荧光显微镜下观察到绝大部分DCs被携带有GFP荧光基团标记的腺病毒转染,呈绿色荧光表达;定量RT-PCR检测显示,转染A20-shRNA腺病毒的树突状细胞A20的表达低于未转染腺病毒的树突状细胞(P<0.05);流式细胞术检测显示,沉默A20后,树突状细胞细胞表面的成熟标记分子CD80、CD86和HLA-DR的表达水平没有变化;ELISA检测显示,沉默A20的树突状细胞分泌IL-1β和IL-6的水平增加(P<0.05),而IL-27的水平降低(P<0.05)。结论携带A20-shRNA的腺病毒能够顺利转染树突状细胞,且A20对树突状细胞的成熟度无调控作用,但沉默A20后能够促进树突状细胞分泌促炎细胞因子IL-1β和IL-6,降低抑炎细胞因子IL-27的表达水平。

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