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超声介导TFO脂质超声微泡对TFO的细胞吸收率及组织因子表达的影响

         

摘要

目的 探讨超声作用下脂质超声微泡对反向硫代磷酸酯寡核苷酸(TFO)的细胞吸收率及内皮细胞组织因子(TF)表达的影响.方法 合成针对切应力反应元性基因序列的GT21-apsTFO),并构建携带TFO的脂质超声微泡.将ECV304细胞分为4组:空白对照(SSRE)组,仅接受切应力作用6h;TFO超声辐照(TFO+U)组,取60μl TFO(终浓度0.2μmol/L)加入细胞,同时给予超声辐照30s;TFO-脂质微泡(TFO-M)组,取60μl携带TFO脂质超声微泡(终浓度0.2μmol/L)加入细胞;TFO-脂质微泡+超声辐照(TFOM+U)组,取60μl携带TFO脂质超声微泡(终浓度0.2μmol/L)加入细胞,同时给予超声辐照30s.后三组进行TFO转染后24h接受切应力(压强1.2Pa)作用6h.荧光显微镜观察TFO的细胞吸收率,免疫荧光法和RT-PCR分别检测TF蛋白和mRNA的表达.结果 TFO-M+U组的TFO转染效率(38.83%±6.52%)高于TFO-M组(9.50%±2.88%)和TFO+U组(12.66%±3.01%,P<0.01),后两组间无显著差异.与SSRE组比较,TFO+U组、TFO-M组和TFO-M+U组中TF蛋白和mRNA的表达降低(P<0.01);TFO-M+U组明显低于TFO+U组和TFO-M组(P<0.01),后两组间无显著差异.结论 在超声介导下,TFO脂质超声微泡可明显增加细胞对TFD的吸收率,从而增强TFO对TF的抑制作用.

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