miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用

周超; 温天明; 胥丽; 刘杰; 邬昊; 李钊

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miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用

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目的探讨miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用.方法取90只小鼠随机分成对照组(Control组)、脓毒症模型组(CLP组)和CLP+miR-140组,每组30只.盲肠结扎穿孔法(CLP法)建立小鼠脓毒症模型,尾静脉注射转染miR-140 agomir,记录30天生存率,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-a)、白细胞介素2(IL-2)表达,流式细胞术检测血清CD4+T和CD8+T细胞百分率,提取腹膜巨噬细胞,流式细胞术分析PD-L1阳性百分率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-140和PD-L1基因表达,蛋白印迹(Western blot)检测PD-L1蛋白表达,荧光素酶报告实验检测miR-140和PD-Ll靶向作用关系.结果与control组相比,CLP组在1、7、14 d的TNF-a、IL-2水平升高(P＜0.01),而TNF-a、IL-2水平呈时间依赖性降低(P＜0.05);CLP组较control组小鼠生存率降低(P＜0.01),CD4+和CD8+细胞百分比升高(P＜0.01),巨噬细胞PD-L1阳性细胞率升高(P＜0.01),miR-140表达水平降低(P＜0.01),PD-L1基因和蛋白表达水平升高(P＜0.01);与CLP组比较,CLP+miR-140组小鼠生存率升高(P＜0.01),CD4+和CD8+细胞百分比升高(P＜0.01),巨噬细胞PD-L1阳性细胞率下降(P＜0.01),miR-140表达水平升高(P＜0.01),PD-L1基因和蛋白表达水平降低(P＜0.01);荧光素酶报告实验结果显示miR-140和PD-L1存在靶向作用关系.结论 miR-140可靶向作用于PD-L1,从而改善小鼠脓毒症引起的免疫抑制.

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来源
《西部医学》 |2021年第1期|10-15|共6页
作者
周超; 温天明; 胥丽; 刘杰; 邬昊; 李钊;
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作者单位

成都市第一人民医院急诊科四川成都610094;

成都市第一人民医院急诊科四川成都610094;

成都市第一人民医院急诊科四川成都610094;

成都市第一人民医院急诊科四川成都610094;

重庆医科大学附属第二医院肝胆外科重庆400010;

成都市第一人民医院急诊科四川成都610094;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类急症、急救处理;
关键词
脓毒症; 免疫抑制; miR-140; PD-L1;

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