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蜡状芽孢杆菌HY-1的生长及对毒死蜱的酶促降解特性

         

摘要

为明确毒死蜱降解菌——蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus HY-1的生长和粗酶液对毒死蜱的降解特性,采用种子液中定量添加毒死蜱和测定粗酶比活力的方法,研究含毒死蜱的种子液培养基中菌株的生长规律和环境因素对粗酶液降解毒死蜱的影响。结果表明:含毒死蜱的培养液和空白对照相比,菌株生长的适应期延长,对数期、稳定期顺序后延。随着培养液中菌体数量的增长,培养液的pH也随之升高。粗酶液中可溶性蛋白的含量为2.21 g/L,测得粗提酶中其米氏常数Km为1.235 6 mmol/L,最大降解速率Vmax为0.022 6μmol/(mg.min)。酶促反应时间为1 h时,粗酶液对50 mg/L毒死蜱的降解率最高可达74%,粗酶液加入体积为1 mL时的比活力最高。在20°C-44°C温度范围内,粗酶液能保持较好的降解活性,最适温度为28°C;在pH 5.0-9.0之间,粗酶比活力都能达最高比活力的66%以上,最适pH为6.0。进一步研究发现,该粗提酶具有较好的热稳定性和pH稳定性,在温度-20°C-40°C、pH 4.0-8.0的条件下,暴露1 h仍能保持较高的比活力。该粗酶液在10-70 g/L的NaCl浓度下保持1 h,仍能高效降解毒死蜱,其耐盐性与目前国内外已报道的毒死蜱降解粗提酶相比是最高的,其开发应用价值大。

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